[일반생물학실험]세균의 형태 관찰 3부






실험 기구 및 시약


1. 실험 재료

1) 현미경, 배지에 배양된 세균 (구균, 간균, 나선균)


2) 백금이, 슬라이드글라스, 커버글라스, 알코올램프, Immersion oil, 렌즈페이퍼


3) 염색시약(Crystal violet), 자일렌



실험 기구 및 시약


1. 실험 과정

1) 세균이 배양된 배지를 준비한다.


2) 알코올램프에 불을 켠 후 백금이를 멸균한다.



3) 백금이로 배양된 각각의 세균을 살짝 컷팅하여 슬라이드글라스위에 얇게 도말한다.


4) 각각의 세균이 도말된 슬라이드 글라스 위에 염색시약인 Crystal violet을 1방울씩 떨어뜨리고 약 30초에서 1분정도 염색한다.


5) 시간이 지나면 염색된 균을 흐르는 물에 살짝 수세한다.



6) 수세한 슬라이드 글라스의 물기를 살짝 제거한 후 커버글라스를 덮고 재물대위에 고정시킨다.


7) 각 각의 배율에 따라 대물렌즈를 바꿔가며 상을 관찰한다. 필요에 따라 (상이 어두울 경우) Immersion oil을 사용한다.


8) 관찰이 끝난 후 Immersion oil을 사용한 렌즈는 자일렌과 렌즈페이퍼를 이용하여 대물렌즈를 닦아준다.


 


주의 사항


1. 가열된 백금이에 화상을 입지 않도록 주의한다.


2. 백금이로 균을 컷팅 할 때 가열된 백금이가 균을 죽게 하지 않도록 배지에서 균이 배양되지 않은 쪽에 백금이를 살짝 눌러 백금이를 식힌다.


3. 염색된 슬라이드글라스를 수세 할 때에는 흐르는 물에 균이 떨어져 나가지 않도록 슬라이드 글라스를 기울여 간접적으로 수세한다.


4. 실험이 끝난 후 대물렌즈를 닦을 때는 대물렌즈에 임의로 휴지나 다른 종이를 이용하지 않고 반드시 지정된 렌즈페이퍼를 사용한다.

 



실험 결과


1. 결과 DATA

1) 간균


  

2) 구균

 


토의 사항


1. 실험 고찰

본 실험은 세균의 형태를 관찰하는 실험이었다. 먼저 교수님께서 준비하신 균은 둥근 구형을 하고 있는 구균, 막대형 모양의 간균, 나선모양의 나선균이었다. 구균의 대표적인 예로는 서론부분에서 언급한 바와 같이 Staphylococcus aureus 와 Streptococcus pyogenes 그리고 간균의 예로는 E. coil, 마지막으로 나선균의 예로는 매독을 일이키는 Treponema pallid㎛ 등이 있다.


관찰시 우리 조에서는 구균과 간균을 관찰 할 수 있었다. 염색되지 않은 미생물 빛을 투과하는 특성 때문에 광학현미경으로 관찰하기가 어렵다. 그래서 관찰시 염색을 하게 되는데 우리가 이번에 사용한 염색시약은 Crystal violet이었다. Crystal violet은 아세트산카민이나 메틸렌블루에 비해 비교적 염색시간이 짧은 염색시약이다. 우선 가장 쉽게 관찰 할 수 있었던 간균은 막대형의 긴 타원체 모양으로 염색 시 남아있던 물기로 움직이는 모습(물에 흐르는...) 또한 볼 수 있었다. 비교적 도말이 잘된 부분에서 주위와 떨어져있는 균 또한 발견되어 그 모양을 명확히 확인할 수 있었다. 그러나 구균의 경우에는 도말이나 상을 잡을 때 잘 되지 않아 제대로 된 상을 잡을 수 없었다.


수업이 끝나기 직전 상을 잡긴 했으나 프레파라트를 만든 지 너무 많은 시간이 흘러 찌그러진 상 밖에 얻을 수 없었다. 아마 주위 수분에 의한 영향이라 생각된다. 아쉽게도 나선균의 상은 찾을 수 없었는데 나선균은 양 끝에 채찍 모양의 편모다발과 운동성을 가지고 있다는 미생물학적 특징이 있다. 구균과 간균은 과거에 관찰을 해보았지만 나선균은 관찰하지 못했었기 때문에 본 실험에서 관찰하지 못한 것이 못내 아쉬웠다.


특히나 나선균은 구균과 간균, 두 균에 비해 크기나 모양에서 많은 다른 차이를 보이기 때문에 더욱 아쉬웠다. 또한 구균을 관찰했을 때는 1000배율에서 다른 배율에 비해 렌즈 면이 작아져 시야가 어두워 Immersion oil을 사용해서 보다 밝고 선명한 상을 얻을 수 있었다. 실험을 통해 세균의 분류와 그에 따른 질병, 염색법과 그 원리 등을 다시금 되살펴 볼 수 있는 시간이 되었다.



참고 문헌


1. 미생물학 제6판. 라이프사이언스. PRESCOTT. p.40, p.486～487


2. 환경미생물학. 동화기술. 송홍규. 오계현. 2007.9.17 발행. 123～125p


3. 생명과학. 동국대학교 출판부. 김주필 외 지음. 2007.8.1 발행. 47p


4. 일반미생물학. 유한문화사. 김창한 외 지음. 2007.11.24 발행. 146p


5. 생물공학. 유한문화사. 고정삼 외 지음. 2006. 3. 23 발행. 65p








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