[생명과학실험]Catalase test, Oxidase test

실험 목적

1. Catalase test

세균의 성상 시험 중 하나로 catalase는 hydrogen peroxide를 물과 oxygen로 분해하는 효소이다.

 

2. Oxidase test

전자 전달계의 마지막 전자 수용체로서 산소 분자에 의해 환원된 cytochrome의 산화를 보는 실험이다.

 

실험 방법

1. Catalase test

① 잘 자란 균을 loop를 이용하여 slide glass에 발라준다.

② 3% H2O2 3~4방울 떨어뜨려 주고 반응을 관찰한다.

 

2. Oxidase test

① 잘 자란 균을 loop를 이용하여 filter paper에 발라준다.

② Oxidase reagent 3~4방울 떨어뜨려 주고 15~30초간 반응을 관찰한다.

 

토의 사항

1. 실험 고찰

본 실험에 사용된 ‘17J66-15’ 균은 catalase test에서 기포가 생긴 positive였고, oxidase test 또한 oxidized cytochrome c가 산화되어 보라색이 나타난 positive였다.

세균에서 모든 세균이 catalase를 이용하여 hydrogen peroxide를 물과 oxygen로 분해하는 것은 아니다. 우선, hydrogen peroxide은 호기성 당분해 산화과정의 최종산물로서 세포 독성작용이 있으므로 세포 내에 축적되면 세포가 죽게 된다. 그러므로 세균들은 catalase를 이용하여 hydrogen peroxide를 분해한다. 

하지만 혐기성 세균이거나 산소를 최종 전자 수용체로 사용하지 않는 세균의 경우 catalase를 가지고 있지 않아 이 test에서 negative 반응이 나타난다. Oxidase test에서 대부분 그람양성세균은 oxidase negative이며, 그람음성세균은 oxidase 반응이 다양하다.