[일반생물학실험]혈관, 혈액, 혈액형과 유전자 빈도 2부

실험 이론 및 원리 - 2

8. 방 형구법

일정한 면적의 방형구 등에 구획을 설정한 후 그 내부에서 개체수, 생물체량, 종수 등을 조사하는 방법이다. 동식물의 개체군밀도나 분포양식, 또는 군집의 종류구성을 조사하기 위해 널리 사용하고 있다. 방형구법은 식물의 종과 개체수(밀도), 종이 출현한 방형구의 수(빈도), 지표를 덮고 있는 정도(피도)를 조사하여 종의 중요치를 알아내는 방법을 의미한다.

1) 군집의 종 구성

① 우점종 : 중요도(상대밀도+상대빈도+상대피도)가 높은 종이 우점종

② 희소종 : 군집에서 개체수가 적은 종

③ 지표종 : 특정 군집에서만 나타나는 종

 

 

9. 포획, 재포획 방법

표지방류법에서 자원량을 추정하기 위하여 생물에 표식한 후 방류하고 일정 기간이 지난 다음 다시 포획하는 방법이다. 동물을 잡아서 표식을 하여 풀어준 다음 다시 무작위로 그 동물들을 잡는 방식이며 어느정도 표식이 되어 있는가를 세어봄으로 필요한 모수를 추정한다.

 

10. 군집의 분석

관찰대상인 개체들을 유사성에 근거하여 보다 유사한 동류집단으로 분류하는 다변량분석 기법이다. 군집분석을 통하여 동일집단으로 분류된 개체들은 공유하는 특성이 유사한 것으로 해석되며, 통계학적 방법은 집단 내 개체들간의 유사성을 개체내 변수들간의 상관계수, 개체간의 거리, 확률적 유사성 측정치 등을 활용하여 측정하고, 이에 기초하여 개체들을 유사한 동류집단으로 분류하는 것이다. 군집분석은 개체들의 분류체계를 수립하는 경우, 개체를 유사집단으로 분류하는 유용한 개념적 틀 또는 기준을 탐색하는 경우, 기존의 분류기준의 적절성에 대한 가설검정을 하는 경우에 유용하게 활용된다.

 

11. 가설 설정(Setting up hypothesis)

1. A형은 항 A혈청에서, B형은 항 B혈청에서 응집되고, O형은 항 A,B혈청에서 모두 응집되지 않으며, AB는 항 A,B혈청에서 모두 응집된다.

2. 항 D혈청을 넣었을 때, 응집된다면 이 유전자는 Rh+형을 띤다.

 

실험 기구 및 시약

1. 실험 재료(Materials)

• 받침유리	• lancet	• 이쑤시개
• Anti-A 혈청	• Anti-B 혈청	• Anti-D (Rho) 혈청
• 소독솜	• 사혈기

 

실험 방법

1. ABO 및 Rh혈액형 판정

1) 1인당 2개의 받침유리를 준비한다.

2) 1개의 받침유리를 흰색 종이 위에 올려놓고 Anti-A, B 혈청을 각각 한 방울씩 떨어뜨린다. 나머지 한 개의 받침ㅇ리도 흰색 종이 위에 올려놓고 Anti-D 혈청을 한 방울 떨어뜨린다.

3) 소독솜으로 손가락 끝을 소독한 후, lancet으로 찔러 피가 나오도록 한다.

4) Anti-A, B, D혈청에 각각 혈액 한 방울씩을 떨어뜨린다.

5) 이쑤시개로 혈액과 항혈청을 각각 골고루 섞은 다음, 응집 여부를 판정한다. 이 때 각각의 혈청을 섞을 때마다 새로운 이쑤시개를 사용하여야 한다.

 

2. 유전자 빈도계산

1) 각 조에서 조사한 ABO식 혈액형의 자료를 수집하여 전체 유전자 빈도를 구한다.

 

3. 영구프레파라트 관찰

1) 미리 준비된 영구프레파라트를 광학현미경에 고정시키고 조별로 이동하면서 관찰한다.

No.	표본명	No.	표본명
1	Stomach Sec(blood vessel)	5	Kidney Rat L.S(blood vessel)
2	Liver Sec(blood vessel)	6	Human blood
3	Limph Node Sec(blood vessel)	7	흰쥐의 혈액
4	Lungs Sec(blood vessel)	8	개구리의 혈액
		9	Fish blood

주의 사항

1. 혈액이 묻은 재료들은 반드시 의료폐기물 박스에 버릴 것

2. 사용한 lancet은 뚜껑을 닫아서 버릴 것

3. 본인의 혈액이 타인에게 묻지 않도록 주의 바람

 

실험 결과

1. ABO 및 Rh혈액형 판정

ABO 및 Rh혈액형 판정 (B형)

1) 항 D혈청에서 응집됨

2) 항 B혈청에서 응집됨

3) 항 A혈청에서 응집되지 않음

 

2. 유전자 빈도계산

O형 유전자 빈도	A형 유전자 빈도
B형 유전자 빈도

토의 사항

1. 고찰(Consideration)

혈액형을 구체적 형질로 표현할 때는 응집원의 종류에 따라 ABO식 혈액형, Rh식 혈액형으로 나뉜다. 더 구체적으로는 ABO식 혈액형은 A형, B형, AB형, O형으로 4종류가 있다. Rh식 혈액형은 Rh+ 형, Rh- 형 2종류가 있다. 즉, 혈액형의 어떤 형질을 중심으로 나누는가에 따라 표현형의 종류가 달라지며 따로따로 해야 한다.

먼저 ABO식 혈액형은 혈액 속 적혈구 표면에 나와 있는 항원과, 혈액 속에 들어 있는 항체에 의해 발현된다. 크게 A형, B형, O형, AB형이라는 4가지 형태로 나타나며, A형은 적혈구 표면에 A형 항원(또는 응집원)을 가지고 B형은 B형 항원을 가지고 있으며 AB형은 A, B형 항원을 모두 가지고 있다. 그리고 O형은 적혈구 표면에 A형, B형 항원이 모두 존재하지 않는다. 이와 반대로, 혈액 속에는 항체가 들어있는데 A형은 항 B형 항체(또는 응집소)를 가지고 있으며 B형은 항 A형 항체, O형은 이 두 가지 항체를 모두 가지고 있고 AB형에게는 이 두 가지 항체가 모두 없다. 

혈액형은 멘델의 법칙을 충실히 따르면서 유전되지만, 우성 인자가 두 개(A, B) 있기 때문에 일반적인 유전 양상과는 다른 유전방식을 보인다. 유전자형에서 O는 열성이기 때문에 일반적인 열성 유전과 동일한 형태로 유전된다. 하지만 A와 B는 동등한 입장에 있는 우성 유전자로 O에 대해서는 우성으로 발현되지만 서로 간에는 불완전우성 관계가 되기 때문에 중간유전 방식으로 유전된다. 결국 A, B, O 세 개의 유전자형이 만드는 대립유전자형은 AA, AO, BB, BO, AB, OO 모두 6가지가 있으며 AA와 AO는 A형, BB와 BO는 B형, AB는 AB형, OO는 O형으로 표현형이 나타나게 되는 것이다.

반면 적혈구 막에 Rh 응집원(응집원D) 유무에 따라 Rh+형, 없으면 Rh-형으로 구분한다. Rh 응집원은 적혈구에 존재하는데, ABO식 혈액형의 응집원과는 달리 단백질로 구성되어 있다. Rh 응집원은 오직 적혈구에만 존재하므로 Rh 응집소가 생성되려면 반드시 Rh+형 적혈구에 노출되어야 한다. 즉, Rh+형 적혈구에 노출되기 전에는 Rh-형인 사람의 체내에 Rh 응집소가 생기지 않는다. 그리고 Rh 응집소는 응집소 α,β와는 달리 분자량이 작아 태반을 통과할 수 있다. Rh 응집소가 있는 항 Rh 혈청에 혈액을 떨어뜨렸을 때 응집 반응이 일어나면 Rh+형, 응집 반응이 일어나지 않으면 Rh-형인 것이다.

[Biology/생물학] - [일반생물학실험]혈관, 혈액, 혈액형과 유전자 빈도 1부