[식품미생물학실험]Bacteriocin 생성능 검증

실험 목적

감성균주와 Bacteriocin생성균주를 이용해서 단백질성 항균물질인 Bacteriocin을 생성할 수 있다.

실험 기구 및 시약

1. 실험 재료

1) 감수성 균주-Curobacterium sp. cf3 (100㎖), Bacteriocin생성균주-Bacillus subtilis Cx1 (30㎖)

2) 피펫 30㎖&100㎖, 피펫 팁, bead, LB배지, 네임 펜, 70% 에탄올

 

실험 방법

1. 실험 과정

1) LB배지에 분반,조,이름,실험제목을 작성한다.

2) LB배지 가운데에 일자로 선을 그어준다.(pipet을 이용하여 Bacteriocin생성균주를 떨어뜨려 주기 위함) LB배지에 bead를 15개 정도 떨어뜨려 준다.

3) 그리고 100㎖ pipet을 이용하여 감수성 균주를 채취하고 LB배지에 분주해 준다.

4) 뚜껑을 닫고 양 옆으로 잘 흔들어 준다.

5) 감수성 균주가 다 흡수가 되면 배지를 거꾸로 뒤집고 뚜껑에 bead가 옮겨지도록 손으로 쳐준다.

6) bead를 70% 에탄올에 버려준다. 30㎖ pipet을 이용하여 Bacteriocin생성균주를 채취해주고 아까 배지 뒷면에 그려준 일자 선을 따라서 천천히 그어준다.

7) 이때 배지가 찢기지 않도록 유의해서 그려주어야 한다. 그리고 뚜껑을 닫아준다.

실험 결과 및 토의

1. 실험 고찰

일단 실험결과가 만족스럽지는 못했다. 다른 결과와 비교해 봤을 때 생성균주 주위를 따라서 선이 생겼는데 내 결과는 그렇지 못했다. 균주가 덜 자랐거나 (활성화가 덜 됨) 희석의 오류 때문이라고 한다. 그리고 다른 조원들과 비교해 봤을 때 내 것은 감수성 균주가 많이 자라지 않았는데 이 부분은 감수성 균주가 배지에 잘 섞이도록 bead를 넣고 흔들어주는 과정에서 오류가 생긴 것 같다.

 bead를 넣고 흔들어 줄 때 전체적으로 잘 묻어나게 흔들어 줘야 할 것 같다. 그리고 피펫을 이용해서 용액을 채취할 때 피펫 팁 안에 기포가 들어가지 않도록 유의해야 하고 분사 할 때도 피펫 팁에 남아있는 용액이 없는지 잘 확인해야 실험 결과가 제대로 나오는 것 같다. 다음 실험에서는 이런 점들을 보완해서 더 좋은 결과가 나올 수 있도록 해야겠다.