[미생물학실험]생화학적 검사를 통한 Staphylococcus spp.의 분리동정 4부

실험 결과

1. 당 발효 (Carbohydrate Fermentation)

▷ 세균이 당을 분해 할 경우 산을 생성 ▷ 배지에 포함된 phenol red는 산성일 경우 노란색으로 변화 ▶ Glucose와 mannitol 배지 모두 붉은 색에서 노란색으로 변화 (+) ▶ 이 세균은 glucose와 mannitol을 산 발효경로를 통해 이용할 수 있다.

2. Catalase 생산

▷세균이 catalase 가지고 있으면 H2O2 처리시 기포(O2)발생 ▷ H2O2 → H2O + O2 때문 ▶ 기포 발생 ▶ 이 세균은 catalase를 가지고 있다.

3. Oxidase 생산

▷ 세균이 oxidase 가지고 있으면 시약의 색깔이 청색으로 변화 ▷ 시약이 인위적 전자수용체로 사용되기 때문 ▶ 색깔 변화 없음(사진에서는 청색으로 변한 것으로 보이나 이는 실험 후 오랫동안 공기에 노출되었기 때문) ▶ 이 세균은 oxidase를 가지고 있지 않다.

4. 아미노산의 decarboxylase 검사

▷ 세균이 arginine을 이용하는 경우 즉, arginine decarboxylase를 가지는 경우 arginine 첨가배지의 맑은 자색이 혼탁한 자색으로 변함

▷ 배지에 포함된 지시약 때문- 산성: 황색, 알칼리: 자주․보라

▶ 결과는 더 배양해 본 후 알아보기로 하였다.

5. DNase 시험 (deoxyribonuclease test)

▷ 세균이 DNase 가지고 있으면 1N HCl 하에서 콜로니 주위가 투명하게 관찰 ▶ 콜로니 주위의 배지가 투명해짐 ▶ 이 세균은 DNase 가지고 있어 DNA를 분해 할 수 있다.

6. 적혈구에 대한 용혈 (hemolysis)

▷ 세균이 완전용혈성(β)을 가지고 있다면 콜로니 주변 투명 ▷ 불완전용혈성(α) 가지고 있다면 콜로니 주변 녹색대 형성 ▷ 용혈성 없다(γ)면 변화 없음 ▶ 콜로니 주위가 투명해짐: 완전용혈성(β) ▶ 이 세균은 병원성을 가질 수 있다.

7. NaCl test

▷ 세균이 운동성을 가진다면 SIM 배지가 전체적으로 혼탁 ▷ 세균이 H2S 생성한다면 검은색 침전물 관찰 ▶ 배지가 혼탁해지지 않음 이 균은 운동성이 없다. ▶ 검은색 침전물 없음 H2S 를 생성하지 않는다.

8. 운동성(motility) 판별 & 황화수소 (hydrogensuleide, H2S) test

▷ 세균이 염에 저항성 있으면 균이 성장함에 따라 배지가 전체적으로 혼탁 ▶ 10% NaCl에서는 배지가 뿌옇게 됨: 세균성장 ▶ 15% NaCl에서는 배지가 뿌옇지 않음: 사망

9. voges-proskauer 반응 (VP reaction)

▷ 세균이 2,3-butanediol 및 acetoin(2,3-butanediol의 전구물질)생성 시 Barrit 시약에 의해 배지가 적색으로 변화

▶ 색깔 변화가 없었다.

10. bile esculin(aesculin) 시험

▷ 세균이 esculin hydrolase를 가지면 esculin을 분해하여 esculetin과 포도당 생성 ▷ Esculetin이 배지 내에 있는 Fe3+ 성분과 결합하여 검은색 화합물 형성   ▶ 검은색 화합물 관찰 안됨 ▶ 이 세균은 esculin hydrolase를 가지고 있지 않다.

☞ 모든 결과를 종합하여 본 세균분리동정 표와 비교했을 때 가장 근접한 세균은 Staphylococcus aureus로 미지의 세균은 Staphylococcus aureus라 결론내렸다.

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